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布氏菌血清学方法可以分为:凝集法、补体结合法、酶联免疫吸附试验法、荧光偏振法、胶体金层析法等。 其中凝集法是通过特异性抗体与颗粒性抗原结合产生凝集的血清学实验,现应用最多的为虎红平板凝集实验、试管凝集实验、二巯基乙醇试管凝集实验、抗人球蛋白抗体实验等。 虎红平板凝集实验(RBPA)其抗原系用抗原性良好的牛种布氏菌株在适宜培养基上培养收获菌体, 经加热灭活, 离心后用虎红染料染色, 悬浮于乳酸缓冲液(PH3.6-3.7)制成。 它能抑制非特异性反应的IgM和增强特异性IgG 的活性, 其反应敏感稳定, 特异性优于试管凝集实验。因此PBPA在很多国家推广使用, 是我国常规的诊断方法之一。
综上布病血清学检测方法众多,每种方法有其自身的特点,在布病的诊断也应用最广,但血清学检测还有一定的假阳性与假阴性,我们应多种检测方法的联合应用以及结合临床和流行病学信息来综合判断。 [1] 孙岩, 肖培, 王娜,等.
近些年IGCA应用到布鲁氏菌抗体诊断上的效果在国内外的文章有许多。 Smits 等使用了分别检测布鲁氏菌IgM、IgG抗体的胶体金层析板,其联合敏感度和特异性可达 96%、99%,可检测急性以及慢性布病患者 [7]。
ELISA法检测布氏菌抗体的能力取决于反应孔中所包被的抗原成分,目前包被抗原的主要为光滑型羊型布氏菌的外膜脂多糖(LPS)中的O链。 所以用S-LPS包被的ELISA法主要检测光滑型的布鲁氏菌,而对粗燥型的布氏菌检测能力不足。 此外由于S-LPS与结肠耶尔森菌、伤寒等革兰阴性菌中的抗原相近,存在交叉反应,但随着抗原纯化技术的提高已逐步消除了交叉反应。 至于用布氏菌的基因纯化细胞外膜蛋白(OMP)作为包被抗原一直是研究的重点,但纯化的OMP抗原制成的ELISA试剂检测能力仍不够理想,或许将来能有所突破吧。 近年文献报道ELISA法检测的敏感性、特异性上的能力均要好于传统凝集法,特别是ELISA法检测布氏菌IgG、IgM联合应用更对疾病诊断有很好的效果【5-6】。